Анализ ПЦР при туберкулёзе

Полимеразная реакция (ПЦР) – что это такое

За открытие самого метода обнаружения вирусов с помощью полимеразной цепной реакции Кэри Муллис получил Нобелевскую премию в 1993 году. Сейчас эта методика успешно применяется по всему миру, хоть и считается новаторской.

Идея заключается в том, что биологический материал: кровь, мокроту, реже — содержимое желудка, помещают в специальный прибор под названием амплификатор. Здесь пробирку нагревают и охлаждают множество раз, строго соблюдая температурный режим.

Важно понимать, что туберкулез – болезнь очень коварная по своей природе. Инфицированный может не догадываться о своем статусе на протяжении долгого времени. Возбудитель находится в организме и никак себя не проявляет.

Схема анализа ПЦР.

Важно! Анализ крови ПЦР на туберкулез сможет выявить наличие возбудителя в организме с большой точностью, но нужно не забывать о необходимости пройти также реакцию Манту и флюорографию для получения полной картины.

Недостатки ПЦР

Анализ ПЦР имеет и свои недостатки, из-за которых его рекомендуют использовать только в совокупности с другими методами, чтобы быть уверенным в результате:

Когда стоит пойти на ПЦР?

Внимание! Не занимайтесь самолечением – обратитесь к врачу! Чем раньше туберкулез будет диагностирован, тем проще и легче пройдет лечение.

Преимущества и недостатки анализа

Диагностика туберкулеза данным методом – распространенная процедура, она имеет ряд преимуществ:

Подготовка к процедуре

Во избежание получения ложного или не информативного результата рекомендовано придерживаться следующих правил:

Повлиять на точность результата могут некоторые лекарственные препараты, особенно антибиотики и гепарин. По этой причине за 3 дня до проведения процедуры следует исключить их применение.

Расшифровка результатов

Срок проведения исследования на ПЦР при туберкулезе составляет 6-7 часов.
Может быть 2 варианта ответа:

Методика исследования

ПЦР-диагностика туберкулеза потребует предварительного забора материала. В качестве него подойдут следующие биологические жидкости:

• кровь;
• моча;
• кал;
• мокрота;
• соскоб с любых органов;
• выделения половых органов;
• спинномозговая жидкость.

Что касается крови и мочи пациента, то, несмотря на достаточно высокую частоту использования именно таких материалов, эффективность и актуальность выявления микобактерии туберкулеза данным способом является сомнительной.

Как проводится сама ПЦР-диагностика

В амплификаторе находятся все необходимые ферменты для того, чтобы обеспечить возможность удвоения молекул ДНК. В дальнейшем оценивается их количество. Таким методом устанавливается факт наличия или отсутствия возбудителя туберкулеза.

При этом доктор пользуется следующей системой оценки:

В результате доктор получает возможность достаточно легко определить наличие или отсутствие возбудителя заболевания в исследуемом материале.

К кому обратиться за проведением анализа?

В настоящее время есть сразу несколько специалистов, которые могут назначать подобный вариант исследования.

Основными среди них являются следующие врачи:

• пульмонолог;
• фтизиатр;
• терапевт;
• педиатр.

Несмотря на то, что назначить ПЦР для диагностики туберкулеза может каждый из этих специалистов, однако оценить результаты такого анализа и установить окончательный диагноз может только врач-фтизиатр.

Помимо этого, он назначит необходимый курс лечения, установит, где именно он должен проходить (на дому или в специализированном стационаре), а также предоставит пациенту все необходимые рекомендации по изменению образа жизни.

Что такое ПЦР?

ПЦР на туберкулез – это полимерный цепной процесс, при котором проходит диагностика и выявление вирусных возбудителей способом генной инженерии. Методика используется в иммунологических, микробиологических, вирусологических и биохимических лабораториях.

Универсальный метод помогает докторам при диагностике и выявляет инфекционный процесс даже после первых часов заражения, задолго до появления симптомов. Исследование возможно даже при маленьком количестве биоматериала.

Что нужно для проведения анализа?

• Несколько отрезков ДНК (праймеров), с них начинается биологический синтез;
• Нуклеотидные соединения, основа молекулы ДНК или же РНК;
• Фермент полимераза, которая ускоряет анализ ПЦР.

В чём основа метода?

Сначала из биоматериала от заразившегося человека выделяется сегмент ДНК, при помощи генно-молекулярных способов биосинтеза дальше определяется тип микроорганизмов, которому принадлежит биофрагмент.

При проведении анализа крови ПЦР на туберкулез в пробирке искусственны путем создается синтез рибонуклеиновых кислот туберкулезной микобактерии.

Обязательно ли делать ПЦР при туберкулезе?

ПЦР на туберкулез делается исключительно тогда, когда не имеется возможности сделать другой инструментальный анализ либо в сложных для диагностики обстоятельствах.

Видео

Видео – ранняя диагностика

Что такое ПЦР диагностика

В основе реакции лежит возможность в искусственных условиях (в пробирке) создать синтез молекул нуклеиновых кислот возбудителя инфекции.

Что необходимо для проведения ПЦР?

Этапы ПЦР диагностики

Как проводится молекулярная диагностика методом ПЦР? Процедура несложная и занимает короткий промежуток времени с учётом сбора материала.

В результате всего 25–30 таких циклов получают нужное количество копий ДНК микроорганизмов, которые легко распознать.

Преимущества диагностики туберкулёза с помощью ПЦР

Это исследование хоть и новое, но хорошо себя зарекомендовало, особенно в спорных случаях, когда диагноз поставить невозможно по ряду причин.

Благодаря ПЦР намного легче обнаружить в исследуемом материале ДНК возбудителя туберкулёза.

Преимущества ПЦР диагностики в следующем.

После всего прочитанного ПЦР кажется практически идеальным методом диагностики, который должны делать всем с подозрением на туберкулёз. Но и здесь есть свои минусы, их необходимо учитывать.

Показания для выявления туберкулёза с помощью ПЦР анализа

ПЦР диагностика туберкулёза проводится чаще всего в спорных случаях. Когда врачи направляют на это исследование?

Достоинства ПЦР

Какие именно преимущества дает процедура анализа ПЦР на туберкулез? Есть несколько основных причин, по которым этот метод широко используется в настоящее время:

1. Очень высокая чувствительность – при наличии хотя бы одного фрагмента генетического материала возбудителя болезни, после многократной репликации в итоговой картине не увидеть его будет невозможно.
2. Высокая специфичность позволяет исключить многие другие близкие по симптоматике заболевания.
3. Оперативность – результат можно будет узнать уже через 5 часов после забора материала, а при некоторых вариантах проведения процедуры – через час.
4. Универсальность – в большинстве случаев один и тот же образец можно проверить на наличие не только туберкулез, но и части других инфекций, например, ВИЧ или герпес. В таком случае получившийся после репликации материал просто сверят с большим количеством возбудителей.
5. Достаточно демократичная стоимость – благодаря универсальности метода лаборатории не слишком завышают цену на этот анализ в отличие от многих других методов исследования.

Что нужно знать о процедуре ПЦР?

Трудность состоит в том, что при отсутствии кашля добиться отхождения мокроты весьма сложно, что сводит на нет главное преимущество метода ПЦР – возможность определить наличие болезни тогда, когда симптомов еще нет.

Существуют ли анализы вместо Манту?

Такие методики имеются. Вместо реакции Манту используются следующие способы диагностирования туберкулеза:

• Т-СПОТ;
• Квантифероновый тест;
• Общий анализ крови;
• ИФА;
• ПЦР.

Целесообразность их применения обусловлена стремлением добиться 100 % выявления инфицированных пациентов.

ПЦР-анализы

Один из наиболее достоверных тестов, используемых для диагностики туберкулеза – ПЦР вместо Манту.

Полимеразная цепная реакция признана самым чувствительным методом выявления туберкулезной инфекции. Ее применение назначается, если имеется подозрение на ложноположительные результаты Манту или проявляется сомнительная реакция на пробу.

Подготовка к сдаче

Исключение вероятности искажения результатов обследования обеспечивает соблюдение стерильности при заборе крови.

Пациента перед сдачей анализа обязательно осматривает врач, так как показания будут искажены, если в организме присутствует любая инфекция или воспалительный процесс.

Виды ПЦР

В отличие от предыдущих методов, ПЦР на туберкулез вместо Манту предполагает не только исследование крови. Не менее важными пробами при этом являются пробы мокроты, слюны и мочи.

Кровь

Определение типа патогенной молекулы ДНК позволяет выявить заболевание, что становится предпосылкой для выбора эффективного курса лечения.

Среди неоспоримых плюсов метода:

Кроме того, что тест дает возможность определить присутствие в организме пациента микобактерий туберкулеза, он с точностью определяет их концентрацию.

Существенным недостатком метода является способность выявлять наличие не только живых, но и погибших патогенных бактерий, что затрудняет определение стадии клинического развития заболевания.

Мокрота

Анализ мокроты отличается информативной точностью. Достоверность выявления туберкулезной палочки в организме достаточно высока.

Для пробы берется мокрота (без слюны), выделяемая при кашле из легких.

Наличие в тесте большого количества белка указывает на присутствие туберкулезной инфекции.

Исследование мокроты позволяет определить стадию заболевания. При запущенной форме болезни (распаде легочной ткани) в образце обнаруживаются бациллы туберкулеза, холестерин и соли кальция.

Диагностика заболевания проводится методом посева образцов мокроты на питательную среду.

Слюна

В ходе исследования слюны берется мазок для определения наличия микроорганизмов, имеющих одинаковую природу с бактериями туберкулезной инфекции.

Недостаток метода: развитие культуры мазка происходит в течение достаточно длительного периода (3-6 недель).

Ценность результатов высева культуры слюны заключается в способности подтвердить диагноз, выставленный с помощью других проб.

ПЦР мочи на туберкулез целесообразно использовать для выявления внелегочных форм болезни с локализацией в почках или мочеполовых путях. Наибольшая достоверность теста достигается при использовании диагностического способа – микобактериурии.

Для подтверждения затем проводится бактериоскопия и посев биоматериала на специальную среду.

Окончательный диагноз на присутствие бацилл Коха выставляется после комплексного обследования и применения различных диагностических методик.

ПЦР-анализы отличаются высокой точностью, но их проведение требует строгое соблюдение технологических требований.

Общая информация

Следует отметить, что анализ на туберкулез должен осуществляться при соблюдении дополнительных норм и учете некоторых нюансов:

Недостатки ПЦР

Рассказывая о преимуществах ПЦР при идентификации поражения легочной системы, нельзя не отметить недостатки представленной методики, в частности, то, что:

Другие методы диагностики и всемирный день борьбы с туберкулезом указывают на то, что микобактерии правильнее всего идентифицировать, когда осуществляется томография, проба Манту и другие мероприятия у детей и людей постарше.

Что такое анализ мочи методом ПЦР?

Тут важна точность, поэтому работники лаборатории должны иметь соответствующие знания и навыки.

Кроме туберкулеза с помощью ПЦР диагностируют и другие инфекционные болезни (гепатит, ИППП, ВИЧ, кандидоз, боррелиоз и др.).

Противопоказания к методу

Какие-либо противопоказания отсутствуют. Делать анализ разрешено:

• у детей;
• при ОРЗ, ОРВИ, ГРИПпе, кори и пр.;
• во время аллергий и др.

Нецелесообразно проводить возрастной категории от 0 до 3-ех лет из-за получения недостоверных результатов.

Данный метод обследования выбирают чаще других из-за отсутствия в нем противопоказаний и высокого процента получения достоверных результатов.

Недостатки

• высокая цена (но она колеблется в зависимости от курса доллара и других факторов);
• бывают ложные результаты (около 10%).

Ложные ответы появляются по разным причинам.

Все вышеперечисленное – повод использовать дополнительные диагностические мероприятия.

Как проводится этот анализ?

Проведение ПЦР при туберкулезе проводится в несколько этапов. Рассмотрим каждый детально.

Оборудование, с помощью которого проводится анализ дорогостоящее и присутствует не везде.

Стоимость анализа в разных центрах

Ниже можно ознакомиться с информацией о том, какие приблизительные цены на ПЦР мочи в медицинских лабораториях. Для сравнения представляем три популярных учреждения.

Наименование медицинского центра	Адрес	Стоимость анализа
Инвитро	г. Москва, Алексеевский, Кулаков переулок, 13	365 рублей
Медлайн-сервис	г. Москва, Пятницкое шоссе, д. 41	390 рублей
Центр Роса	г. Москва, улица Гвоздева, д. 5	564 рубля

Из вышеописанного можно сделать вывод, что стоимость на анализ не превышает 400 рублей. Такая сумма не может остановить больного при необходимости подтверждения диагноза.

Имейте в виду! Иногда в клиниках присутствуют акции и скидки. Следить за ними можно на сайтах лабораторий, узнать в телефонном режиме или не ресепшене в самом офисе.

Виды лучевых способов нахождения болезни

• Флюорография – способ диагностирования заболевания, знакомый каждому жителю СНГ. При помощи рентгеновых лучей исследуются легкие и внутригрудные лимфатические узлы.
• Рентгенография грудной клетки – похожий на флюорографию, но более качественный метод обнаружения инфекции. Снимок получается подробнее и в двух проекциях, но эта процедура примерно в шесть раз дороже. Обычно ей пользуются после того, как возникли серьезные подозрения на заболевание.
• Компьютерная томография осуществляется как дополнительная диагностика, применяемая также после серьезных оснований на наличие инфекции.

К хирургическим способам диагностирования относят эндоскопию бронхов, а также медиастиноскопию и торакокоскопию.

Первый метод заключается в исследовании бронхиального дерева легких при помощи «зонда» в этот орган. Остальные два способа дают возможность изучить плевральную часть легкого при помощи прокола грудной клетки.

Все три метода являются серьезным хирургическим вмешательством и применяются чаще всего в процессе прогрессирования заболевания.

К лабораторным исследованиям относят:

• Анализ мокроты на туберкулезную палочку.
• Микроскопические исследования.
• ПЦР диагностика туберкулеза